重組腸激酶在25℃下的穩定性

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一、試劑:

 

試劑A: 25 mM Tris HCl Buffer, pH 8.0 at 25°C (稱取Tris 0.303gr, 溶解在80ml 純化水中, 25°C,用2mol/LHCl 調pH 8.0,加純化水至100ml.)  

 

試劑B. 重組腸激酶酶液 

REK161101 (10U/µl, 1kU/),于25°C,室溫保存.

 

試劑C. 底物溶液

底物蛋白溶液: 50μg/, 1mg/ml, 儲存在 -80°C.

 

二、操作步驟:

a.REK酶液25℃下放置,分別于放置的第12357天測活。

b.按《重組腸激酶檢驗標準操作規程》測定酶活。如下:用試劑A稀釋REK 溶液至0.1 unit /μl,取1 µl 至底物溶液中50µl (50μg/, 1mg/ml).混勻,25 °C酶切14-16h, SDS-PAGE分析酶切結果。 

 

三、實驗結果:

 

 

Fig. 1 REK 溶液 25℃保存穩定性

Lane 1, 底物; Lane2-6酶切結果:Lane2, 1d; Lane 3, 2d; Lane 4, 3d; Lane5, 5d; Lane 6, 7d.  

 

四、結論:  

REK溶液 25℃ 放置7天內穩定。

 

 

 
 
 

2019年11月5日 11:17
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