序列分析純重組胰蛋白酶如何溶解使用,如何儲存?

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 1)如何溶解重組胰蛋白酶凍干粉?

   使用50mM HAc 溶解或稀釋。

 

2)使用時,溶解液和最適pH緩沖溶液?

   使用時,按照使用終濃度直接稀釋在50mM NH4HCO3 或者ph7-8的酶切緩沖溶液中(含有目的酶切蛋白)。

 

3)酶切緩沖液中酶和底物的比例是多少?

   在酶切緩沖液中建議使用1mM CaCl2,重組胰蛋白酶:目的蛋白=1:20-1:100

 

4)酶切時的緩沖液最適pH

   最適pH7.0-8.0的緩沖液,通常用50mM NH4HCO3或者Tris-HCl

 

5)溶解后溶液如何保存?如果反復凍融,穩定性如何?

   溶液儲存于-70℃。可反復凍融5次,無降解,無活性損失。

 

 

 

 

  

2019年11月5日 11:17
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